產(chǎn)品名稱：Cygnus E.coli大腸桿菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F410

產(chǎn)品規(guī)格：1 KIT

產(chǎn)品品牌：Cygnus

產(chǎn)品簡介：

Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒主要設(shè)計(jì)用于檢測產(chǎn)物重組表達(dá)過程中大腸桿菌宿主細(xì)胞污染，試劑盒使用的多克隆抗體對數(shù)百種HCPs具有反應(yīng)性。 Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒檢測低濃度可達(dá)到 0.2ng/mL

產(chǎn)品使用時(shí)一定要做好保護(hù)措施：0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。

設(shè)計(jì)用于檢測產(chǎn)物重組表達(dá)過程中大腸桿菌宿主細(xì)胞污染，試劑盒使用的多克隆抗體對數(shù)百種HCPs具有反應(yīng)性。 Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒檢測低濃度可達(dá)到 0.2ng/mL。

ELISA檢測相比Western Blot：Western Blots檢測過程復(fù)雜并需借助程序分析結(jié)果。而且，Western Blot本質(zhì)上是定性分析，不能得到定量結(jié)果，檢測靈敏性也受到樣本體積的限制。Western Blot在下游純化過程中檢測產(chǎn)物HCPs缺乏靈敏度和特異性。而微量滴定板ELISA檢測可以克服上述限制。ELISA具備高度靈敏性，可獲得半定量結(jié) 果，是純化工藝，過程控制，常規(guī)質(zhì)量檢測的選擇。

組成成份：

● Anti- E. coli:HRP(辣根過氧化物酶記)?            1x12mL    F411(Product#)

● Anti- E. coli coated微量滴定板?                        12x8孔?   F412

● E. coli HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)     1mL/瓶?  F413

● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸)  ???           1x12mL?F006

● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)?                          1x12mL?  F005

● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)?                1x50mL    F004

檢測原理：

大腸桿菌E. coli檢測是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的E. coli HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-E. coli 抗體的辣根過氧化物酶同時(shí)反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-E. coli 蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物 反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與E. coli  HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出E. coli HCPs蛋白含量。

檢測過程： 

取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25µl Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液，對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti-E. coli:HRP(#F411)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育90分鐘，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100µl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

結(jié)果分析：

Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測結(jié)果數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要滴定到兩個(gè)小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。

相關(guān)訂購信息：

品牌        貨號          名稱

Cygnus F500  Vero Cell HCP ELISA Kit Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 大腸桿菌宿主蛋白殘留檢測試劑盒

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產(chǎn)品名稱：Cygnus E.coli大腸桿菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F410

關(guān)于公司：

Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等

Cygnus公司產(chǎn)品涵蓋了E.Coli大腸桿菌宿主蛋白殘留、CHO細(xì)胞宿主蛋白殘留、HEK293細(xì)胞宿主蛋白殘留、Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留以及細(xì)胞培養(yǎng)添加物如BSA殘留、Protein A殘留、insulin胰島素殘留等的檢測試劑盒。