產(chǎn)品名稱：Cygnus HCP畢赤酵母菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F140

產(chǎn)品規(guī)格：1 KIT

產(chǎn)品品牌：Cygnus

產(chǎn)品簡介：

畢赤酵母基因表達(dá)系統(tǒng)經(jīng)過十多年發(fā)展，成為較完善的外源基因酵母表達(dá)系統(tǒng)，具有易于高密度酵母發(fā)酵，欲表達(dá)基因可以穩(wěn)定整合在宿主酵母基 因組中，能使產(chǎn)物有效分泌并適當(dāng)糖基化，培養(yǎng)方便經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)。Pichia pastoris畢赤酵母基因表達(dá)系統(tǒng)利用強(qiáng)效可調(diào)控啟動子AOX1，已高效表達(dá)了HBsAg、TNF、EGF、破傷風(fēng)毒素C片段、基因工程抗體等多種外 源基因，證實(shí)Pichia pastoris畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)為高效、實(shí)用、簡便 ，以提高表達(dá)量并保持產(chǎn)物生物學(xué)活性為突出特征的外源基因表達(dá)系統(tǒng)，而且非常適宜擴(kuò)大為工業(yè)規(guī)模Pichia pastoris畢赤酵母發(fā)酵。

檢測原理：

Pichia pastoris HCPs檢測是一個雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的Pichia pastoris HCPs蛋白與標(biāo)記有抗- Pichia pastoris抗體的辣根過氧化物酶同時反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗- Pichia pastoris蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加 TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與Pichia pastoris HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出Pichia pastoris HCPs蛋白含量。

檢測過程：

標(biāo)準(zhǔn)檢測：取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25μl標(biāo)準(zhǔn)液，對照物和樣品至待測孔→移取100μl anti- Pichia pastoris:HRP(#F141)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育3小時（快速檢測時溫育1小時），180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

結(jié)果分析：

標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 4, 20, 75, 250ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要重復(fù)滴定到兩個小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。

產(chǎn)品用途：

用于檢測在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中重組表達(dá)的產(chǎn)物宿主細(xì)胞蛋白污染。*檢測濃度<0.3ng/mL。

相關(guān)訂購信息：

品牌        貨號          名稱

Cygnus F500  Vero Cell HCP ELISA Kit Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 大腸桿菌宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F650 HEK 293 HCP ELISA Kit 人胚腎293細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F140 Pichia pastoris HCP ELISA Kit 畢赤酵母菌宿主蛋白殘留檢測試劑盒

Cygnus F510 BHK HCP ELISA Kit 幼倉鼠腎細(xì)胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱：Cygnus HCP畢赤酵母菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F140

關(guān)于公司：

Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等

Cygnus公司產(chǎn)品涵蓋了E.Coli大腸桿菌宿主蛋白殘留、CHO細(xì)胞宿主蛋白殘留、HEK293細(xì)胞宿主蛋白殘留、Vero細(xì)胞宿主蛋白殘留以及細(xì)胞培養(yǎng)添加物如BSA殘留、Protein A殘留、insulin胰島素殘留等的檢測試劑盒。