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Takara Cellartis iPS定向分化肝臟細(xì)胞技術(shù)解析

更新時間:2023-11-22

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以肝臟細(xì)胞為模型的實驗越來越受到重視,在肝臟病變機(jī)理研究、藥物代謝研究、藥物毒理評估等方面有廣闊的應(yīng)用前景。然而,以個體原代肝細(xì)胞為材料來源會產(chǎn)生如取材困難、材料批間差大、無法長期穩(wěn)定供應(yīng)等一系列難以克服的問題。因此,通過iPS批量轉(zhuǎn)化生產(chǎn)肝細(xì)胞的方法就顯示出特別的優(yōu)勢。Cellartis iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System可以穩(wěn)定地、規(guī)模化地實現(xiàn)iPS向hepatocyte的誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化生產(chǎn),而且誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化出的肝細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá)藥物代謝相關(guān)酶系統(tǒng)和藥物轉(zhuǎn)運系統(tǒng)。

人類iPS細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的簡單而通用的系統(tǒng)
Cellartis細(xì)胞iPS向肝細(xì)胞分化系統(tǒng)是一個完整的系統(tǒng),包括所有培養(yǎng)基、補(bǔ)充劑和將任何iPS細(xì)胞系分化為肝細(xì)胞的方案(Laydon, Bangham, and Asquith 2015)。該方案模擬體內(nèi)肝臟發(fā)育:iPS細(xì)胞首先分化為最終內(nèi)胚層(DE)細(xì)胞,然后進(jìn)一步分化為成熟肝細(xì)胞。分化成熟肝細(xì)胞在分化第21天準(zhǔn)備好用于您的研究應(yīng)用,并且具有至少11天的實驗時間窗口。


iPS細(xì)胞到肝細(xì)胞分化系統(tǒng)概述。完整的系統(tǒng)包括培養(yǎng)基、補(bǔ)充物和將任何iPS細(xì)胞系分化為肝細(xì)胞的方案。

培養(yǎng)效果:

從hiPS細(xì)胞系中衍生同質(zhì)終代內(nèi)胚層細(xì)胞。A. RT-qPCR分析顯示,DE細(xì)胞中干細(xì)胞標(biāo)志物OCT4 (A1)和NANOG (A2)的表達(dá)下調(diào)。與未分化的hiPS細(xì)胞相比,DE細(xì)胞中DE標(biāo)記物CXCR4 (A3)和SOX17 (A4)的mRNA表達(dá)強(qiáng)烈上調(diào)。胚胎外標(biāo)記物SOX7 (A5)的低表達(dá)表明胚胎外內(nèi)胚層細(xì)胞極少發(fā)生。b組DE標(biāo)記物SOX17 (B2, B5)和干細(xì)胞標(biāo)記物OCT4 (B3, B6)的免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,來自hiPS細(xì)胞系ChiPSC6b和P11025的DE細(xì)胞中存在少量OCT4免疫陽性細(xì)胞核,而大多數(shù)SOX17免疫陽性細(xì)胞核。細(xì)胞核用DAPI染色(B1, B4)。


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